Generating neutralizing antibodies, Th1 response and MHC non restricted immunogenicity of HIV-I env and gagpeptides in liposomes and ISCOMs with in-built adjuvanticity

Agrawal, Lokesh; Haq, W; Hanson, Carl Veith; Rao, D Nageswara

doi:10.1186/1476-8518-1-5

Journal of Immune Based Therapies and Vaccines

Table 1 IgG isotypes for mice of different haplotypes (H-2^b, H-2^k, H-2^q, H-2^d). Estimation of IgG isotypes for different peptide formulations in mice bearing haplotypes H-2^b(1A), H-2^k(1B), H-2^q(1C), H-2^d(1D). Levels of IgG1, IgG2a, IgG2b and IgG3 and determined as described in Materials and Methods at fixed antisera dilution (1:100). IgG2a,2b,2c and IgG3 were determined using ELISA in all the three bleeds for all the four peptides in different antigenic formulations using the isotyping kit. The O.D. values represent mean ± SEM of sixteen mice (four for each haplotype) as studied for the bleeds obtained on 27th (I), 42nd(II), and 60th (III) day.

From: Generating neutralizing antibodies, Th1 response and MHC non restricted immunogenicity of HIV-I env and gagpeptides in liposomes and ISCOMs with in-built adjuvanticity

Table 1A (H-2^b)
Formulation	Peptide in Alum			Peptide in Liposomes			Peptide with MA729 in Liposomes			Peptide in ISCOMs
Isotype↓ Bleed→	I	II	III	I	II	III	I	II	III	I	II	III
V3-gp41 Peptide
IgG1	0.58 ± 0.10	0.56 ± 0.02	0.36 ± 0.05	0.18 ± 0.02	0.32 ± 0.05	0.43 ± 0.10	0.32 ± 0.06	0.58 ± 0.10	0.30 ± 0.12	0.32 ± 0.10	0.45 ± 0.17	0.29 ± 0.10
IgG2a	0.67 ± 0.16	0.76 ± 0.10	0.45 ± 0.02	0.56 ± 0.07	0.65 ± 0.14	0.50 ± 0.10	0.54 ± 0.12	0.78 ± 0.20	0.73 ± 0.21	0.95 ± 0.30	1.24 ± 0.26	1.10 ± 0.31
IgG2b	0.78 ± 0.10	0.74 ± 0.25	0.67 ± 0.10	0.98 ± 0.22	1.20 ± 0.42	1.49 ± 0.36	1.35 ± 0.33	1.34 ± 0.21	1.50 ± 0.18	1.54 ± 0.09	1.23 ± 0.39	1.43 ± 0.32
IgG3	0.43 ± 0.17	0.32 ± 0.12	0.37 ± 0.04	0.54 ± 0.10	0.43 ± 0.08	0.40 ± 0.05	0.60 ± 0.10	0.70 ± 0.10	0.45 ± 0.06	0.60 ± 0.10	0.58 ± 0.03	0.43 ± 0.05
gp41 Peptide
IgG1	0.10 ± 0.01	0.12 ± 0.01	0.10 ± 0.03	0.10 ± 0.04	0.42 ± 0.05	1.16 ± 0.10	0.10 ± 0.03	0.27 ± 0.02	0.30 ± 0.06	0.10 ± 0.01	0.14 ± 0.02	0.10 ± 0.01
IgG2a	0.13 ± 0.02	0.21 ± 0.02	0.11 ± 0.01	0.10 ± 0.01	0.52 ± 0.03	0.18 ± 0.02	0.10 ± 0.01	0.60 ± 0.10	0.40 ± 0.12	0.10 ± 0.01	0.20 ± 0.01	0.10 ± 0.02
IgG2b	0.31 ± 0.01	0.32 ± 0.13	0.23 ± 0.01	1.20 ± 0.23	1.29 ± 0.32	0.10 ± 0.01	1.12 ± 0.32	1.34 ± 0.02	1.31 ± 0.12	0.58 ± 0.10	1.46 ± 0.23	0.78 ± 0.32
IgG3	0.13 ± 0.03	0.13 ± 0.02	0.14 ± 0.01	0.09 ± 0.01	0.18 ± 0.01	0.21 ± 0.02	0.41 ± 0.03	0.28 ± 0.01	0.58 ± 0.10	0.08 ± 0.01	0.32 ± 0.03	0.2 ± 0.04
p17 Peptide
IgG1	0.58 ± 0.10	0.64 ± 0.24	0.65 ± 0.03	0.72 ± 0.18	0.70 ± 0.17	0.84 ± 0.34	0.64 ± 0.28	0.79 ± 0.03	0.63 ± 0.16	0.69 ± 0.18	0.60 ± 0.10	0.70 ± 01.8
IgG2a	0.85 ± 0.20	0.89 ± 0.32	0.90 ± 0.09	0.80 ± 0.02	1.01 ± 0.04	0.83 ± 0.34	0.85 ± 0.32	1.07 ± 0.22	0.81 ± 0.31	0.70 ± 0.18	1.01 ± 0.15	0.77 ± 0.24
IgG2b	0.61 ± 0.21	0.79 ± 0.17	0.61 ± 0.09	0.71 ± 0.14	1.16 ± 0.12	1.28 ± 0.16	0.71 ± 0.09	1.18 ± 0.02	1.31 ± 0.23	0.61 ± 0.03	0.87 ± 0.21	1.29 ± 0.23
IgG3	0.46 ± 0.15	0.45 ± 0.14	0.35 ± 0.12	0.40 ± 0.20	0.52 ± 0.21	0.59 ± 0.15	0.40 ± 0.12	0.48 ± 0.08	0.51 ± 0.01	0.59 ± 0.32	0.52 ± 0.10	0.50 ± 0.13
p24 Peptide
IgG1	0.34 ± 0.01	0.30 ± 0.08	0.35 ± 0.02	0.70 ± 0.16	0.42 ± 0.12	0.53 ± 0.14	0.49 ± 0.12	0.27 ± 0.03	0.47 ± 0.05	0.89 ± 0.05	0.32 ± 0.04	0.48 ± 0.15
IgG2a	0.59 ± 0.13	0.46 ± 0.15	0.48 ± 0.14	0.73 ± 0.15	0.93 ± 0.23	0.90 ± 0.32	0.76 ± 0.23	1.06 ± 0.40	0.80 ± 0.20	0.60 ± 0.13	0.94 ± 0.16	0.88 ± 0.15
IgG2b	0.46 ± 0.17	0.72 ± 0.08	0.89 ± 0.23	0.40 ± 0.02	0.90 ± 0.04	0.91 ± 0.09	0.56 ± 0.17	0.90 ± 0.23	1.07 ± 0.32	0.80 ± 0.10	0.96 ± 0.16	1.02 ± 0.32
IgG3	0.58 ± 0.19	0.40 ± 0.08	0.42 ± 0.05	0.36 ± 0.02	0.32 ± 0.05	0.35 ± 0.05	0.52 ± 0.09	0.40 ± 0.13	0.35 ± 0.09	0.53 ± 0.04	0.37 ± 0.10	0.34 ± 0.12
Table 1B (H-2 ^k )
Formulation	Peptide in Alum			Peptide in Liposomes			Peptide with MA729 in Liposomes			Peptide in ISCOMs
Isotype ↓ Bleed →	I	II	III	I	II	III	I	II	III	I	II	III
V3-gp41 Peptide
IgG1	0.46 ± 0.02	0.28 ± 0.03	0.42 ± 0.13	0.10 ± 0.04	0.60 ± 0.10	0.63 ± 0.20	0.47 ± 0.15	0.62 ± 0.12	0.38 ± 0.09	0.26 ± 0.07	0.78 ± 0.12	0.67 ± 0.20
IgG2a	0.91 ± 0.23	0.46 ± 0.09	0.27 ± 0.07	0.93 ± 0.21	0.90 ± 0.32	0.40 ± 0.09	0.50 ± 0.07	0.83 ± 0.03	0.70 ± 0.04	0.54 ± 0.14	0.80 ± 0.15	0.84 ± 0.16
IgG2b	0.73 ± 0.18	0.62 ± 0.19	0.90 ± 0.29	1.32 ± 0.30	1.24 ± 0.34	1.08 ± 0.32	0.70 ± 0.10	1.07 ± 0.20	1.35 ± 0.27	0.70 ± 0.17	0.80 ± 0.19	0.95 ± 0.16
IgG3	0.26 ± 0.02	0.17 ± 0.03	0.61 ± 0.04	0.26 ± 0.09	0.31 ± 0.10	0.29 ± 0.04	0.16 ± 0.03	0.37 ± 0.04	0.18 ± 0.08	0.24 ± 0.08	0.16 ± 0.02	0.26 ± 0.02
gp41 Peptide
IgG1	0.10 ± 0.03	0.11 ± 0.04	0.20 ± 0.05	0.73 ± 0.16	1.04 ± 0.24	0.70 ± 0.26	0.40 ± 0.06	1.27 ± 0.43	1.28 ± 0.35	0.60 ± 0.02	0.30 ± 0.02	0.06 ± 0.01
IgG2a	0.12 ± 0.01	0.24 ± 0.10	0.20 ± 0.04	0.63 ± 0.09	1.27 ± 0.26	1.02 ± 0.29	0.47 ± 0.19	1.35 ± 0.09	1.41 ± 0.12	0.69 ± 0.16	0.79 ± 0.11	0.60 ± 0.10
IgG2b	0.25 ± 0.08	0.26 ± 0.09	0.27 ± 0.07	0.94 ± 0.20	1.31 ± 0.30	1.23 ± 0.19	1.32 ± 0.20	1.37 ± 0.41	1.39 ± 0.32	0.97 ± 0.10	1.14 ± 0.19	1.24 ± 0.16
IgG3	0.17 ± 0.20	0.07 ± 0.16	0.10 ± 0.03	0.70 ± 0.09	0.47 ± 0.07	0.30 ± 0.03	0.37 ± 0.03	0.47 ± 0.22	0.58 ± 0.06	0.40 ± 0.03	0.31 ± 0.01	0.25 ± 0.08
p17 Peptide
IgG1	0.45 ± 0.10	0.53 ± 0.03	0.50 ± 0.14	0.60 ± 0.17	0.67 ± 0.19	0.70 ± 0.03	0.53 ± 0.12	0.60 ± 0.18	0.50 ± 0.11	0.51 ± 0.10	0.61 ± 0.14	0.59 ± 0.09
IgG2a	0.44 ± 0.03	0.79 ± 0.13	0.60 ± 0.16	0.60 ± 0.08	0.82 ± 0.23	0.68 ± 0.11	0.50 ± 0.10	0.83 ± 0.07	0.67 ± 0.01	0.50 ± 0.02	0.63 ± 0.17	0.60 ± 0.02
IgG2b	0.38 ± 0.02	0.65 ± 0.16	0.53 ± 0.03	0.48 ± 0.02	1.09 ± 0.19	1.05 ± 0.18	0.45 ± 0.10	1.05 ± 0.28	1.07 ± 0.21	0.46 ± 0.31	0.72 ± 0.26	1.07 ± 0.20
IgG3	0.24 ± 0.09	0.32 ± 0.06	0.21 ± 0.02	0.35 ± 0.08	0.43 ± 0.10	0.45 ± 0.07	0.20 ± 0.01	0.36 ± 0.08	0.38 ± 0.03	0.30 ± 0.02	0.33 ± 0.06	0.35 ± 0.02
p24 Peptide
IgG1	0.28 ± 0.03	0.38 ± 0.07	0.31 ± 0.03	0.40 ± 0.10	0.59 ± 0.04	0.51 ± 0.16	0.40 ± 0.18	0.50 ± 0.15	0.42 ± 0.12	0.40 ± 0.12	0.60 ± 0.23	0.42 ± 0.23
IgG2a	0.52 ± 0.21	0.66 ± 0.22	0.69 ± 0.11	0.60 ± 0.09	0.70 ± 0.09	0.62 ± 0.16	0.40 ± 0.06	0.76 ± 0.03	0.78 ± 0.14	0.80 ± 0.10	0.77 ± 0.21	0.48 ± 0.08
IgG2b	0.51 ± 0.07	0.54 ± 0.03	0.58 ± 0.09	0.70 ± 0.16	0.81 ± 0.03	0.90 ± 0.31	0.70 ± 0.26	0.92 ± 0.21	0.60 ± 0.22	0.80 ± 0.21	0.97 ± 0.17	0.45 ± 0.05
IgG3	0.34 ± 0.10	0.32 ± 0.09	0.31 ± 0.01	0.36 ± 0.10	0.88 ± 0.07	0.64 ± 0.21	0.48 ± 0.01	0.52 ± 0.09	0.69 ± 0.16	0.60 ± 0.20	0.72 ± 0.19	0.44 ± 0.09
Table 1C (H-2 ^q )
Formulation	Peptide in Alum			Peptide in Liposomes			Peptide with MA729 in Liposomes			Peptide in ISCOMs
Isotype↓ Bleed →	I	II	III	I	II	III	I	II	III	I	II	III
V3-gp41 peptide
IgG1	0.18 ± 0.07	0.14 ± 0.02	0.17 ± 0.03	0.14 ± 0.01	0.10 ± 0.01	0.36 ± 0.06	0.13 ± 0.02	0.32 ± 0.12	0.33 ± 0.03	0.51 ± 0.02	0.63 ± 0.11	0.70 ± 0.09
IgG2a	0.26 ± 0.06	0.45 ± 0.05	0.56 ± 0.07	0.70 ± 0.02	0.77 ± 0.01	0.89 ± 0.10	0.95 ± 0.21	0.93 ± 0.12	0.90 ± 0.10	1.23 ± 0.09	1.16 ± 0.02	1.31 ± 0.20
IgG2b	0.64 ± 0.05	0.56 ± 0.06	0.38 ± 0.07	0.90 ± 0.21	0.95 ± 0.09	1.30 ± 0.16	0.94 ± 0.14	0.96 ± 0.23	1.31 ± 0.33	1.24 ± 0.20	1.34 ± 0.14	1.10 ± 0.27
IgG3	0.12 ± 0.02	0.10 ± 0.01	0.19 ± 0.03	0.11 ± 0.01	0.17 ± 0.04	0.23 ± 0.03	0.15 ± 0.06	0.26 ± 0.17	0.34 ± 0.08	0.10 ± 0.02	0.20 ± 0.01	0.70 ± 0.03
gp41 Peptide
IgG1	0.24 ± 0.01	0.23 ± 0.04	0.06 ± 0.01	0.41 ± 0.09	0.42 ± 0.06	0.32 ± 0.02	0.34 ± 0.10	0.40 ± 0.16	0.36 ± 0.10	0.30 ± 0.03	0.31 ± 0.10	0.24 ± 0.05
IgG2a	0.52 ± 0.04	0.57 ± 0.05	0.60 ± 0.05	0.65 ± 0.04	0.77 ± 0.07	0.89 ± 0.08	0.60 ± 0.10	1.28 ± 0.09	0.95 ± 0.18	0.84 ± 0.21	0.73 ± 0.30	0.65 ± 0.17
IgG2b	0.67 ± 0.31	0.72 ± 0.08	0.25 ± 0.02	1.40 ± 0.15	1.35 ± 0.19	1.01 ± 0.21	1.14 ± 0.22	1.09 ± 0.34	1.46 ± 0.52	0.91 ± 0.19	0.82 ± 0.21	0.72 ± 0.08
IgG3	0.18 ± 0.06	0.28 ± 0.03	0.23 ± 0.02	0.51 ± 0.03	0.51 ± 0.06	0.30 ± 0.01	0.28 ± 0.06	0.28 ± 0.07	0.53 ± 0.17	0.29 ± 0.03	0.32 ± 0.16	0.46 ± 0.20
p17 Peptide
IgG1	0.34 ± 0.08	0.32 ± 0.02	0.24 ± 0.17	0.76 ± 0.16	0.30 ± 0.07	0.34 ± 0.01	0.38 ± 0.02	0.26 ± 0.01	0.30 ± 0.06	0.39 ± 0.09	0.29 ± 0.02	0.28 ± 0.01
IgG2a	0.51 ± 0.01	0.36 ± 0.04	0.38 ± 0.06	0.72 ± 0.02	0.90 ± 012	0.88 ± 0.21	0.74 ± 0.15	0.92 ± 0.10	0.89 ± 0.19	0.56 ± 0.12	1.03 ± 0.02	0.86 ± 0.20
IgG2b	0.46 ± 0.02	0.71 ± 0.08	0.88 ± 0.09	0.50 ± 0.23	0.95 ± 0.32	0.91 ± 0.30	0.55 ± 0.23	0.92 ± 0.32	0.94 ± 0.28	0.52 ± 0.09	0.99 ± 0.21	1.05 ± 0.21
IgG3	0.56 ± 0.01	0.42 ± 0.14	0.40 ± 0.15	0.56 ± 0.08	0.32 ± 0.02	0.36 ± 0.05	0.32 ± 0.07	0.27 ± 0.08	0.35 ± 0.05	0.34 ± 0.12	0.40 ± 0.11	0.34 ± 0.10
p24 Peptide
IgG1	0.40 ± 0.05	0.44 ± 0.08	0.38 ± 0.02	0.30 ± 0.03	0.70 ± 0.10	0.60 ± 0.11	0.61 ± 0.08	0.32 ± 0.03	0.42 ± 0.06	0.29 ± 0.06	0.76 ± 0.13	0.50 ± 0.02
IgG2a	0.54 ± 0.11	0.62 ± 0.21	0.61 ± 0.06	0.76 ± 0.03	0.88 ± 0.05	1.04 ± 0.18	0.67 ± 0.02	1.07 ± 0.18	1.09 ± 0.21	0.63 ± 0.21	1.00 ± 0.20	1.10 ± 0.17
IgG2b	0.36 ± 0.08	0.32 ± 0.04	0.55 ± 0.04	0.69 ± 0.14	1.08 ± 0.16	0.90 ± 0.19	0.72 ± 0.07	1.18 ± 0.13	1.16 ± 0.22	1.60 ± 0.07	1.19 ± 0.03	0.90 ± 0.09
IgG3	0.31 ± 0.03	0.57 ± 0.07	0.38 ± 0.03	0.46 ± 0.04	0.49 ± 0.09	0.50 ± 0.10	0.31 ± 0.04	0.48 ± 0.05	0.42 ± 0.11	0.52 ± 0.23	0.54 ± 0.02	0.32 ± 0.10
Table 1D (H-2 ^d )
Formulation	Peptide in Alum			Peptide in Liposomes			Peptide with MA729 in Liposomes			Peptide in ISCOMs
Isotype↓ Bleed →	I	II	III	I	II	III	I	II	III	I	II	III
V3-gp41 peptide
IgG1	0.33 ± 0.03	0.27 ± 0.02	0.42 ± 0.03	0.65 ± 0.08	0.52 ± 0.02	0.47 ± 0.02	0.30 ± 0.01	0.10 ± 0.06	0.10 ± 0.01	0.21 ± 0.09	0.28 ± 0.02	0.45 ± 0.05
IgG2a	0.49 ± 0.02	0.59 ± 0.11	0.91 ± 0.19	0.69 ± 0.04	1.03 ± 0.09	1.93 ± 0.19	0.46 ± 0.10	0.70 ± 0.20	0.38 ± 0.04	0.54 ± 0.03	0.40 ± 0.07	0.80 ± 0.01
IgG2b	0.97 ± 0.03	1.81 ± 0.12	1.70 ± 0.21	1.10 ± 0.21	1.74 ± 0.20	1.47 ± 0.03	1.70 ± 0.32	1.32 ± 0.21	0.90 ± 0.08	1.76 ± 0.03	1.24 ± 0.08	1.80 ± 0.14
IgG3	0.35 ± 0.08	0.27 ± 0.04	0.51 ± 0.18	0.70 ± 0.15	0.40 ± 0.08	0.65 ± 0.05	0.30 ± 0.04	0.65 ± 0.02	0.32 ± 0.02	0.29 ± 0.08	0.45 ± 0.03	0.42 ± 0.02
gp41 Peptide
IgG1	0.13 ± 0.03	0.17 ± 0.02	0.12 ± 0.03	0.63 ± 0.06	0.91 ± 0.05	0.43 ± 0.13	0.44 ± 0.04	0.97 ± 0.23	1.20 ± 0.21	0.30 ± 0.20	0.40 ± 0.01	0.52 ± 0.10
IgG2a	0.23 ± 0.10	0.34 ± 0.07	0.36 ± 0.09	0.87 ± 0.03	0.90 ± 0.05	1.01 ± 0.09	0.54 ± 0.15	1.45 ± 0.19	1.60 ± 0.28	0.76 ± 0.17	0.83 ± 0.18	0.76 ± 0.13
IgG2b	0.36 ± 0.12	0.45 ± 0.01	0.43 ± 0.06	1.23 ± 0.02	1.21 ± 0.01	1.10 ± 0.04	1.34 ± 0.09	1.43 ± 0.03	1.49 ± 0.43	1.04 ± 0.09	0.97 ± 0.12	0.80 ± 0.21
IgG3	0.17 ± 0.03	0.07 ± 0.01	0.10 ± 0.02	0.34 ± 0.03	0.57 ± 0.08	0.74 ± 0.12	0.54 ± 0.16	0.67 ± 0.09	0.60 ± 010	0.48 ± 0.02	0.67 ± 0.13	0.60 ± 0.03
p17 Peptide
IgG1	0.19 ± 0.01	0.36 ± 0.05	0.28 ± 0.06	0.02 ± 0.01	0.65 ± 0.21	0.50 ± 0.02	1.21 ± 0.09	0.50 ± 0.10	0.67 ± 0.12	0.23 ± 0.02	0.55 ± 0.19	0.81 ± 0.09
IgG2a	0.27 ± 0.03	0.40 ± 0.03	0.61 ± 0.12	0.95 ± 0.25	0.92 ± 0.21	0.72 ± 0.01	0.85 ± 0.10	0.95 ± 0.17	0.86 ± 0.18	0.77 ± 0.18	0.98 ± 0.16	0.90 ± 0.32
IgG2b	0.49 ± 0.07	0.68 ± 0.09	0.69 ± 0.07	0.82 ± 0.06	0.85 ± 0.05	0.99 ± 0.24	0.87 ± 0.14	0.95 ± 0.32	0.97 ± 0.21	0.63 ± 0.01	1.05 ± 0.20	1.15 ± 0.22
IgG3	0.31 ± 0.06	0.40 ± 0.04	0.40 ± 0.12	0.28 ± 0.02	0.24 ± 0.02	0.23 ± 0.01	0.25 ± 0.08	0.21 ± 0.01	0.21 ± 0.04	0.28 ± 0.10	0.14 ± 0.01	0.22 ± 0.02
p24 Peptide
IgG1	0.24 ± 0.01	0.41 ± 0.10	0.43 ± 0.18	0.20 ± 0.06	0.68 ± 0.03	0.57 ± 0.08	0.24 ± 0.10	0.61 ± 0.01	0.66 ± 0.14	0.22 ± 0.01	0.53 ± 0.12	0.60 ± 0.12
IgG2a	0.40 ± 0.07	0.53 ± 0.03	0.60 ± 0.03	0.97 ± 0.07	0.99 ± 0.21	0.81 ± 016	0.95 ± 0.12	1.08 ± 0.17	0.98 ± 0.07	0.90 ± 0.22	0.96 ± 0.19	0.95 ± 0.09
IgG2b	0.49 ± 0.02	0.67 ± 0.02	0.69 ± 0.12	0.84 ± 0.21	0.85 ± 0.12	0.98 ± 0.21	0.60 ± 0.08	0.93 ± 0.02	1.25 ± 0.02	0.62 ± 0.11	1.05 ± 0.22	1.15 ± 0.09
IgG3	0.31 ± 0.03	0.39 ± 0.12	0.40 ± 0.12	0.20 ± 01	0.31 ± 0.09	0.33 ± 0.02	0.24 ± 0.01	0.25 ± 0.05	0.21 ± 0.03	0.28 ± 0.02	0.24 ± 0.08	0.24 ± 0.01

IgG2a,2b,2c and IgG3 were determined using ELISA in all the three bleeds for all the four peptides in different antigenic formulations using the isotyping kit. The O.D. values represent mean. ± SEM of four mice for the bleeds obtained on 27th (I), 42nd(II), and 60th (III) day.

Back to article page